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蛋白純化與分析

來源:biotop.com.cn

基于原核及哺乳動物細胞兩大系統,提供從基因到蛋白的一站式服務,最終產品可用于動物實驗、結構分析、擴大培養等。

原核表達系統

通過基因克隆技術,將外源目的基因,通過構建表達載體并導入表達菌株的方法,使其在特定原核生物或細胞內表達。原核表達系統用于表達重組蛋白有以下優點:易于生長和控制;易于培養,實驗耗費少;可選擇多種大腸桿菌菌株及與之匹配的具各種特性的質粒。

1. E. coli表 達菌株篩選?

蛋白純化與分析 質粒擴增?

蛋白純化與分析 轉化并挑選陽性克隆?

蛋白純化與分析 SDS-PAGE電泳檢測培養后中目標蛋白的表達情況,并挑選合適的單克隆菌株用于目標蛋白的 表達。

可提供表達菌株:DH5α, Top10, BL21 (DE3)

提供客戶:重組質粒的表達菌株及表達檢測報告

服務周期:1周

 

 

 

2. 目標蛋白表達及純化(小試)?

蛋白純化與分析 搖瓶培養1L重組細菌,誘導表達目標蛋白。?

蛋白純化與分析 通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白?

蛋白純化與分析 蛋白鑒定:SDS-PAGE、HPLC-SEC、WB、Biacore Affinity、吸收光譜檢測 、內毒素檢測

提供客戶:純化好的目標蛋白5~10mg及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒═ag)或切

除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上

服務周期:3-6周

3. 大規模制備?

蛋白純化與分析 大型搖床,一次性可以培養4L重組細菌?

蛋白純化與分析 10L細菌發酵罐規模

提供客戶:合格的目標蛋白及服務報告

服務周期:面談

真核表達系統

由于應用于該領域的重組蛋白基本上均需要翻譯后修飾,以獲得與天然分子相同的生物活性,而哺乳動物細胞自身具備蛋白折疊和翻譯后修飾的功能,因此很多客戶選擇哺乳動物細胞蛋白表達系統,表達高質量的重組蛋白。

1. 重組蛋白瞬時表達服務 (HEK293 或CHO細胞)

蛋白純化與分析 制備可用于轉染哺乳動物細胞的質料

蛋白純化與分析 哺乳動物細胞瞬時轉染,可實現無血清培養,重組蛋白表達評估和條件優化??

蛋白純化與分析 小規模蛋白表達和純化

(500 ml-1000mL培養物)?

蛋白純化與分析 大規模蛋白表達和純化

(5L無血清培養,瞬時表達,5-20mg/L表達量)(可選)?

蛋白純化與分析 蛋白鑒定:SDS-PAGE、HPLC-SEC、WB、Biacore Affinity、吸收光譜檢測、內毒素檢測

提供客戶:合格的目標蛋白以及服務報告

服務周期:3-8周

2. 重組蛋白穩定表達細胞株的構建和蛋白表達純化服務 (CHO 細胞)?

蛋白純化與分析 制備可用于轉染哺乳動物細胞的質粒

蛋白純化與分析 哺乳動物細胞轉染,篩選穩定轉染的細胞?

蛋白純化與分析 單克隆篩選(可選)和重組蛋白表達評估

蛋白純化與分析 無血清懸浮馴化?

蛋白純化與分析 細胞庫建立?

蛋白純化與分析 小規模蛋白表達和純化

(500 ml-2L培養物)(可選)?

蛋白純化與分析 大規模蛋白表達和純化

(10L-50L,可選)

蛋白純化與分析 蛋白鑒定:SDS-PAGE、HPLC-SEC、WB、Biacore Affinity、吸收光譜檢測、內毒素檢測

提供客戶:合格的目標蛋白以及服務報告

服務周期:面談

 
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